智立中特（武漢）生物科技有限公司主要致力于質粒微生物資源的保護、共享和持續利用，圍繞我國生命科學研究、生物技術創新和產業發展等重大需求，探索、發現、收集國內外的微生物資源，妥善長期保存管理；在保證生物安全和保護知識產權的前提下，為工農業生產、衛生健康、環境保護、科研教育提供質粒載體物物種資源、基因資源、信息資源和專業技術服務。旗下質粒載體網是一款提供質粒載體展示及定制的專業型網站，由智立中特（武漢）生物科技有限公司聯合多家企業公司科研院校共同打造！主要展示了各種基因類型下的質粒載體！

　　我們的工作主要包括：廣泛分離、收集、保藏、交換和供應各類微生物質粒菌種；保存用于專利程序的各種可培養生物材料；質粒載體類保藏技術研究；微生物分離、培養技術研究；微生物鑒定和復核技術研究；保藏菌種的資料情報收集和提供及編輯微生物菌種目錄。

　　目前保存各類載體資源超過20000余種，質粒微生物約5000株，另外我們還代理國外微生物菌種資源，如addgene，安捷倫，thermo，atcc等。

　　名稱:293F(人胚腎細胞)

　　別稱:HEK-293-F;HEK 293-F;HEK-293F;HEK293F;293-F;293 F;HEK293-F

　　種屬:人

　　年齡（性別）:胚胎

　　生長特性:貼壁細胞

　　細胞形態:上皮細胞樣

　　生長培養基:DMEM)＋10%FBS＋1%P/S

　　推薦傳代比例:1:3-1:4

　　推薦換液頻率2~3次/周

　　凍存條件

　　凍存液：55%基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

　　溫度：液氮

　　培養條件

　　氣相：空氣，95%；CO2，5%

　　溫度：37℃

　　驗收細胞注意事項

　　1、收到293F(人胚腎細胞)，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。

　　2、收到293F(人胚腎細胞)，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。

　　3、收到293F(人胚腎細胞)后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時血清濃度可以加到15％去培養。若細胞迏到80%左右，血清濃度還是在10％。

　　4、收到293F(人胚腎細胞)時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下5-10ML培養基繼續培養：超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000轉/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。

　　5、將培養瓶置于37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。

　　6、24小時后，293F(人胚腎細胞)已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之完全脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。

　　7、貼壁細胞，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37℃，5%CO2培養。